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    如何處理ELISA實驗中的樣本污染?

    更新時間:2025-10-24  |  點(diǎn)擊率:570
      如何處理ELISA實驗中的樣本污染?
     
      在ELISA實驗中處理樣本污染需從樣本采集、處理到檢測全流程進(jìn)行嚴(yán)格防控,以下是關(guān)鍵措施:
     
      一、樣本采集與保存
     
      避免溶血與細(xì)菌污染‌
     
      血液樣本采集時需使用無抗凝劑或EDTA-Na2抗凝管,避免溶血(血紅蛋白干擾HRP顯色)及細(xì)菌污染(內(nèi)源性酶干擾)‌。
     
      分裝凍存‌
     
      樣本需按單次用量分裝,短期保存于2-8℃,長期保存于-70℃以下,避免反復(fù)凍融導(dǎo)致蛋白降解‌。
     
      二、樣本處理規(guī)范
     
      特殊樣本預(yù)處理‌
     
      唾液/尿液‌:離心去除雜質(zhì)(唾液4000×g離心10分鐘,尿液1000×g離心15分鐘)‌。
     
      組織樣本‌:用預(yù)冷PBS勻漿后5000×g離心5-10分鐘,取上清檢測。
     
      稀釋與混勻‌
     
      高濃度樣本需預(yù)實驗確定稀釋倍數(shù),稀釋后輕柔混勻避免氣泡,劇烈振蕩可能破壞蛋白結(jié)構(gòu)‌。
     
      三、操作流程控制
     
      分區(qū)操作與耗材管理‌
     
      設(shè)立樣本制備區(qū)、加樣區(qū)、孵育區(qū),使用一次性槍頭(每樣本更換)和獨(dú)立移液器,避免交叉污染‌。
     
      加樣與洗滌‌
     
      垂直加樣防止飛濺,洗板時確保洗液注滿孔位,拍板力度適中避免殘留酶標(biāo)物‌。
     
      四、環(huán)境與儀器維護(hù)
     
      溫育與顯色‌
     
      孵育溫度穩(wěn)定在37℃,顯色時間嚴(yán)格按說明書控制,避光操作以減少非特異性顯色‌。
     
      儀器清潔‌
     
      定期檢查洗板機(jī)管道是否堵塞,酶標(biāo)儀濾光片需清潔,高滴度樣本檢測后清潔儀器‌。
     
      通過上述措施可有效降低ELISA樣本污染風(fēng)險,確保檢測準(zhǔn)確性。
     
      注:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
     
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