如何判斷ELISA實驗是否成功?
 

　　ELISA實驗成功的判斷需結合‌陰性/陽性對照有效性‌、‌標準曲線質量‌及‌樣本結果可靠性‌，具體標準如下：
 

　　1. 對照有效性驗證‌
 

　　陰性對照‌：OD值應接近空白孔(通常≤0.1)，且無假陽性信號‌。
 

　　陽性對照‌：OD值需顯著高于Cut-off值(如P/N比值≥2)，證明試劑活性正常‌。
 

　　Cut-off值判定‌：樣本OD值≥陰性對照均值+2~3SD(或按試劑說明書閾值)判為陽性‌。
 

　　2. 標準曲線質量‌
 

　　線性范圍‌：R²≥0.99，且樣本OD值落在標準曲線線性區(qū)間內。
 

　　梯度合理性‌：標準品OD值應隨濃度遞增呈規(guī)律性變化，無跳孔或異常波動‌。
 

　　3. 樣本結果可靠性‌
 

　　重復性‌：同一樣本重復孔間OD值差異應<20%‌。
 

　　信號強度‌：樣本OD值需顯著高于陰性對照(競爭法則相反)，若信號過弱需復測或調整樣本濃度‌。
 

　　4. 常見失敗原因‌
 

　　假陽性/陰性‌：洗滌不凈、封閉不足或抗體交叉反應‌。
 

　　曲線異常‌：標準品失效、孵育時間不足或酶標板污染‌。
 

　　5. 結果表示方法‌
 

　　定性‌：陰陽性判定(如OD值>Cut-off值)‌。
 

　　定量‌：通過標準曲線計算濃度，需標注稀釋倍數(shù)。
 

　　若需進一步優(yōu)化實驗，可參考：ELISA實驗操作視頻。
 

　　注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
 

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