以下是關于?人Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒實驗方案?的詳細操作指南：

　　TZXD-0435  人Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理?

　　雙抗體夾心法?：包被抗體與樣本中ColⅣ結合后，加入酶標抗體形成復合物，通過TMB顯色定量。

　　競爭法?(部分試劑盒)：樣本中ColⅣ與sws標記抗原競爭結合抗體，顯色強度與濃度負相關。

　　二、試劑準備?

　　平衡溫度?：所有試劑使用前需室溫平衡30分鐘。

　　洗滌液配制?：25倍濃縮液需用蒸餾水稀釋至500mL工作液。

　　標準品稀釋?：凍干粉用稀釋液復溶后，按梯度稀釋(如24μg/L→12μg/L→6μg/L等)。

　　三、樣本處理?

　　血清/血漿?：

　　采集后需3000×g離心10分鐘(血清)或30分鐘(血漿)分離上清。

　　避免使用含NaN3或肝素抗凝劑。

　　組織勻漿?：生理鹽水勻漿后3000×g離心10分鐘取上清。

　　保存條件?：分裝凍存于-20℃，避免反復凍融。

　　四、操作步驟?

　　加樣?：

　　空白孔不加樣，標準孔加梯度標準品，樣本孔先加稀釋液40μl再補加樣本10μl(5倍稀釋)。

　　溫育?：37℃孵育30分鐘，洗滌3次。

　　顯色?：

　　加入TMB底物避光顯色15分鐘，終止液終止反應。

　　檢測?：酶標儀450nm測OD值，繪制標準曲線計算濃度。

　　五、注意事項?

　　避免污染?：使用一次性吸頭，不同批號試劑勿混用。

　　板條保存?：未用板條需密封防潮，-20℃保存。

　　顯色控制?：底物B避光，顯色后立即檢測。

　　六、技術參數?

　　檢測范圍?：0.313-50ng/mL(不同品牌有差異)。

　　靈敏度?：可達0.113ng/mL。

　　如需具體品牌操作差異或問題排查，可進一步說明需求。

　　天津天正信達供應：RNA逆轉錄試劑盒、逆轉錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學、分子生物學、免疫學等專業人員的研發、構建了儀器設備齊全的實驗技術平臺，主要包括AKTA、高壓均質機、全波長酶標儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設備。